Гостиница Ярвил
В связывается с неподвижной фазой, находящейся в колонке, то коэффициент К по отношению к носителю А очень велик, тогда как величины К для других растворенных веществ практически равны нулю. В качестве
примеров чрезвычайно специфично взаимодействующих веществ можно привести пары фермент—ингибитор, антиген — антитело, лектин — клетка:
Так, колонку для выделения ДНК-деполимеразы методом аффинной хроматографии готовят путем химического связывания ингибитора ДНК-деполимеразы с поверхностью какого-либо подходящего гранулированного материала, например агарозы или полиакриламида. Пропускание через такую колонку фугата клеток, подвергнутых лизису (см., например, стадию 4 в примере 11.1), приводит к практически количественному связыванию фермента ДНК-деполимеразы с неподвижной фазой, причем почти все другие вещества не задерживаются колонкой.
Из уравнения (11.186) следует, что для всех других растворенных веществ. Впоследствии связанный фермент можно десорбировать путем элюирования раствором ингибитора ДНК-деполимеразы или какого-либо другого подходящего агента.
Широкому распространению аффинной хроматографии
<< назад вперед >>