Гостиница Ярвил

операций при очистке инсулина человека, гормона роста человека и лейкоци­тарного интерферона человека, синтезированных в культурах рекомбинантных Е. coli. В каждом процессе для достижения необходимой степени чистоты использовали ряд операций осаж­дения и хроматографического разделения [22].

Если белок синтезируется в рекомбинантной Е. coli в боль­ших количествах, то он часто накапливается в виде внутрикле­точных структур, обладающих специфической преломляющей способностью (см. рис. 6.27). Эти упорядоченные образования легко отделяются от дезинтегрированных путем лизиса клеток центрифугированием. В таких образованиях, однако, молекулы белков связаны множеством поперечных связей, поэтому для выделения белка в нативном виде осадок после центрифугиро­вания необходимо растворить и ренатурировать. На рис. 11.40 приведена методика растворения этих структур методом окис­лительного сульфитолиза с последующей ренатурацией раство­римого денатурированного белка за счет его складывания в соответствующую третичную структуру и образования дисульфидных связей. Эти методы были разработаны исследователь­ской группой компании Genencor, Inc. в связи с работами по клонированию и экспрессии гена реннина в Е. coli.

<< назад вперед >> return_links(1); ?>